Upute za uzimanje uzoraka

Uzorak stolice za bakteriološku pretragu

  • uzorak stolice uzeti na početku bolesti, u pravilu prije početka antibiotičkog liječenja.
  • uzorak stolice ne smije biti kontaminiran mokraćom ili sadržavati dezinficijense i deterđente.
  • potrebna su 2-3 mL uzorka tekuće stolice ili 1-2 g uzorka stolice  (veličina lješnjaka) u sterilnoj posudici. Uzorak stolice treba biti tekući ili poluformirani (poprima oblik posudice);
  • uzorak stolice treba dostaviti u laboratorij najkasnije 2 sata od uzimanja, a ukoliko to nije moguće, uzorak se može pohraniti na +4°C, najduže 24 sata do dostave u laboratorij.
  • obrisak rektuma uzeti jedino kada nije moguće dobiti uzorak stolice (djeca, teški bolesnici). Bris uložiti  2,5 cm iza analnog  sfinktera i nježno zarotirati. Na brisu moraju biti vidljivi tragovi stolice. Daljnji postupak kao s uzorkom stolice
  • Negativni nalaz se izadaje za 2 dana. Pozitivni nalaz se izdaje za 3-4 dana.

Uzorak stolice za virološku pretragu

  • uzorak stolice uzeti u prva 3 dana od početka  simptoma.
  • potrebna su 2-3 mL uzorka tekuće stolice ili 1-2 g uzorka stolice  (veličina lješnjaka) u sterilnoj posudici. Uzorak stolice treba biti tekući ili poluformirani (poprima oblik posudice);
  • uzorak stolice treba odmah dostaviti u laboratorij a ako to nije moguće uzorak može biti pohranjen na +4°C najduže tijekom 48 sati. Dostavlja se u putnom hladnjaku ili termos boci;
  • uzorak stolice može biti pohranjen duže vrijeme na temperaturi od –18°C i niže;
  • zamrznuti uzorak stolice treba dostaviti u laboratorij na ledu u termos boci;
  • Nalaz se izdaje unutar 24 sata.

 Uzorak stolice za parasitološku pretragu

  • potrebna su 2-3 mL uzorka tekuće stolice ili 1-2 g uzorka stolice  (veličina lješnjaka). Uzorak stolice treba biti tekući ili poluformirani (poprima oblik posudice);
  • uzorak stolice treba odmah dostaviti u laboratorij ili ga pohraniti na +4ºC tijekom 24-48 sati.
  • za dokaz amebne dizenterije uzorak proljevaste stolice mora biti pregledan najduže 30 minuta od uzimanja, stoga preporučujemo prethodni dogovor s liječnikom mikrobiologom.
  • 7 dana prije uzimanja uzorka stolice, bolesnik  ne smije biti pregledan radiološki uz pomoć kontrastnog sredstva, jer ovaj postupak umanjuje vjerojatnost nalaza cista crijev-nih protista.
  • za dokaz kriptosporidioze rutinski se obrađuju samo uzorci proljevaste stolice.
  • Nalaz se izdaje unutar 24 sata.

Perianalni otisak za dokaz jaja parasita  Enterobius vermicularis

  • predmetno stakalce (26 x 76 mm) s ljepljivom trakom («selotejp») može se dobiti u Službi za mikrobiologiju Zavoda ili se načiniti u ambulanti;
  • perianalni otisak uzeti ujutro nakon ustajanja, a prije pranja ili kupanja;
  • ljepljivu traku treba odlijepiti sa stakalca, raširiti gluteuse i nalijepiti traku preko perianalnih nabora uz blago pritiskanje;
  • traku zatim skinuti i nalijepiti ponovo preko stakalca;
  • predmetno stakalce staviti u ambalažu i dostaviti u laboratorij tijekom 24 sata;
  • Nalaz se izdaje unutar 24 sata. 

Obrisak ždrijela i tonzila za bakteriološku pretragu

  • drvenom špatulom pritisnuti jezik i laganom rotacijom štapića obloženog vatom (bris) uz pritisak obrisati tonzile, tonzilarne lože i ždrijelo, pazeći da se ne dotakne jezik ili sluznica usne šupljine.
  • kada su vidljivi gnojni čepići na tonzilama treba ih obrisati.
  • uzorak treba dostaviti u laboratorij unutar 2 sata od uzimanja.
  •   ako to nije moguće obrisak treba uložiti u Stewart transportni medij, pohraniti na  sobnoj temperaturi (22-25°C) i dostaviti u laboratorij unutar 24 sata.
  • Negativan nalaz se izdaje za 2 dana. Pozitivan nalaz sa antibiogramom se izdaje za 3 dana. 

Obrisak nosa za bakteriološku pretragu

  • sterilnim brisom ovlaženim u fiziološkoj otopini obrisati vestibulum nosa rotirajućm  pokretima
  • bris uložiti u transportni Stewart ili Amies medij i unutar 24 sata pri sobnoj temperaturi dostaviti u laboratorij
  • uzorak se uzima za otkrivanje stafilokoknog kliconoštva ili za ispitivanje lezije u nosu
  • Negativan nalaz se izdaje za 2 dana. Pozitivan nalaz sa antibiogramom se izdaje za 3 dana.

Obrisak nazofarinksa za bakteriološku pretragu

  • rotirajući uvesti tanki sterilni vateni štapić u stražnji nazofarinks; pustiti da se bris natopi sekretom te ga nasaditi na hranjivu podlogu ili u transportni medij. Bris se uzima iz obje nosnice, osim ukoliko se dobije dovoljno materijala već nakon obriska prve nosnice. Samo na posebno traženje liječnika uzima se, na isti način, obrisak za izolaciju Bordetella pertussis; tada je važno uzimati uzorak sa štapićem koji je priložen uz transportnu podlogu u koju se odmah po uzimanju uzorka vraća.
  • Negativan nalaz se izdaje za 2 dana. Pozitivan nalaz sa antibiogramom se izdaje za 3 dana.

 Obrisak ždrijela i tonzila za mikološku pretragu

  • drvenom lopaticom pritisnuti jezik i laganom rotacijom uz pritisak  štapićem obloženim vatom obrisati tonzile, tonzilarne lože i ždrijelo pazeći da se ne dotakne jezik ili sluznica usne šupljine;
  • kada su vidljivi gnojni čepići na tonzilama treba ih obrisati;
  • Nalaz se izdaje za 2-4 dana. 

Uzorak nazofaringealnog sekreta ili obrisak nazofarinksa za virološku pretragu

  • uzima se u manje djece mukoznim ekstraktorom, vakuum pumpom i sondom uz eventualnu prethodnu aplikaciju 1 mL sterilne fiziološke otopine, na Odjelu ili ambulanti za pedijatriju
  • uzorak u dobro zatvorenom ekstraktoru treba odmah poslati u laboratorij ili pohranjenog na +4ºC dostaviti u laboratorij najkasnije unutar 24 sata od uzimanja;
  • obrisak nazofarinksa se uzima na isti način kao za bakteriološku pretragu
  • Nalaz se izdaje unutar 24 sata.

Uzorak sputuma za bakteriološku i mikološku pretragu

  • jutarnji iskašljaj je najpogodniji uzorak.
  • prije uzimanja sputuma bolesnika treba uputiti o ispravnom postupku davanja uzorka.
  • bolesnik treba oprati zube četkicom bez zubne paste i isprati usta vodom da bi se smanjio broj popratnih bakterija, dijelova hrane ili ostataka lijekova.
  • važno je upozoriti bolesnika da nazofaringealni sekret ili slina nisu iskašljaj.
  • bolesnik se treba duboko nakašljati i izbaciti iskašljaj (5-10 mL) u sterilnu posudu.
  • uzorak iskašljaja treba dostaviti  u laboratorij u roku od 2 sata, najkasnije 24 sata od uzimanja uz pohranu na +4°C;
  • za dokaz tuberkuloze preporučuje se uzimanje najmanje dva uzorka iskašljaja (u sterilnoj posudici s čepom na navoj. Posudica mora biti dostavljena u plastičnoj vrećici. Ne skupljati više uzoraka u jednoj po-sudici. Prema indikaciji pretrage se mogu ponoviti.
  • Negativan nalaz se izdaje za 2 dana. Pozitivan nalaz sa antibiogramom se izdaje za 3-4 dana.

Uzorak aspirata bronha i bronhoalveolarnog lavata za  bakteriološku i mikološku pretragu  

  • treba poslati što veću količinu uzorka.
  • uzorak treba što prije dostaviti u laboratorij ili ga treba pohraniti do dostave na +4ºC.
  • Negativan nalaz se izdaje za 2 dana. Pozitivan nalaz sa antibiogramom se izdaje za 3-4 dana

Uzorci pleuralne, peritonealne i zglobne tekućine za bakteriološku i mikološku pretragu

  • najmanje 1 mL uzorka (u sterilnoj epruveti s čepom na navoj) treba poslati odmah u laboratorij.
  • ako to nije moguće uzorak treba pohraniti na +4ºC i dostaviti u laboratorij unutar 24 sata od uzimanja.
  • Negativan nalaz se izdaje za 2 dana. Pozitivan nalaz sa antibiogramom se izdaje za 3-4 dana

Obrisak spojnice oka za bakteriološku i mikološku pretragu

  • ako nema dovoljno eksudata (spojnica je suha) prije uzimanja obriska, obrisak (drveni štapić s vatom) treba umočiti u transportni medij ili sterilnu fiziološku otopinu.
  • treba dobro obrisati spojnicu donje vjeđe i forniksa od vanjskog prema unutarnjem kutu oka.
  • ako treba uzeti obrisak spojnice oba oka, za svako oko treba koristiti poseban bris i dostaviti u laboratorij odvojeno, svakog u svojem sterilnom kontejneru.
  • obriske treba dostaviti u laboratorij što prije, najbolje u roku od dva sata.
  • Negativan nalaz se izdaje za 2 dana. Pozitivan nalaz sa antibiogramom se izdaje za 3-4 dana

Uzorci iz rane, ulkusa, apscesa i dekubitusa za bakteriološku i  mikološku  pretragu

(obrisak suhe rane nije pogodan materijal za bakteriološku obradu)

  • ranu, ulkus, apsces i dekubitus treba očistiti sterilnom fiziološkom otopinom, a okolnu kožu sa 76%-tnim alkoholom.
  • kruste i nekrotično tkivo treba odstraniti.
  • uzorak treba uzeti s odgovarajućeg mjesta – s ruba rane, uz stijenke apscesa.
  • za dokaz uzročnika može se koristiti aspirat, komadići tkiva ili stijenke apscesa. Obrisak centra rane ima najmanju dijagnostičku vrijednost.
  • uzorke treba dostaviti odmah u laboratorij.
  • ako to nije moguće uzorak treba pohraniti u  Stuartov transportni medij na sobnu tempera-turu (20-25°C) i dostaviti u laboratorij u roku od 24 sata.
  • na uputnici treba navesti vrstu uzorka, anatomsko mjesto odakle je uzorak uzet,  antimikrobnu terapiju i druge važne podatke o bolesniku (npr. diabetes mellitus, bolesti imunološkog sustava, liječenje kortikosteroidima i dr.).
  • na uputnici treba navesti koja se pretraga traži (npr. izolacija aerobnih i/ili anaerobnih bakterija, izolacija kvasaca, dokaz MRSA).
  • Negativan nalaz se izdaje za 2 dana. Pozitivan nalaz sa antibiogramom se izdaje za 3-4 dana

Uzorak seruma, krvi za serološke pretrage

  • uzeti 3-5 mL krvi (10 mL ukoliko se traži više pretraga) natašte i bez antikoagulansa;
  • u laboratorij može biti dostavljen uzorak krvi ili seruma.
  • uzorak seruma može biti pohranjen nekoliko tjedana na +4-8°C, a na –18°C i mnogo duže.
  • uzorak krvi ne smije biti zamrznut jer nastupa hemoliza te je takav uzorak neupotrebljiv za serološko testiranje.
  • hilozan, hemoliziran ili zagađen uzorak seruma nije pogodan za serološke pretrage.
  • Nalazi se izdaju za 2-3 dana ili po dogovoru

Uzorak krvi (hemokultura) za bakteriološku i mikološku pretragu

  • uzorak krvi treba uzeti venepunkcijom u trenutku početka porasta tjelesne temperature( pola sata do sat prije pika temp.) u pravilu prije početka antibiotičke terapije.
  • nije preporučljivo uzimati uzorak krv iz intravenskog katetera.
  • uzorak krvi treba odmah uz bolesnički krevet ucijepiti u tekuće hranilište za kultivaciju aerobnih bakterija i gljiva (aerobno hranilište) i anaerobnih bakterija (anaerobno hranilište) prema uputi proizvođača hranilišta.
  • uzorke krvi za hemokulturu treba uzeti  2-3 puta tijekom 24 sata.
  • količina uzorka krvi: 3-10 mL krvi odrasle osobe u svaku bočicu;.
  • količina uzorka krvi:1-3 mL krvi djece u svaku bočicu.
  • ucijepljena hranilišta (hemokulture) treba odmah dostaviti u laboratorij, a ako to nije moguće, hemokulture treba pohraniti u termostat na 37°C kroz 20 sati. Ako dostava niti tada nije moguća, hemokulture mogu biti pohranjene najduže 48 sati na 22-25°C.
  • Pozitivni rezultati se odmah javljuju telefonski na odjel (preliminarni i definitivni). Negativan nalaz se izdaje za 5 dana. Vrijeme izdavanja pozitivnog nalaza ovisi o brzini rasta izoliranog patogena.

Uzorak krvi za parasitološku pretragu

  • za dokaz malarije treba uzeti jednu (za izradu preparata krvnog razmaza) i 2-3 kapi krvi (za izradu preparata guste kapi) iz jagodice prsta bolesnika. Preporuča se napraviti više preparata!
  • za izradu preparata krvnog razmaza:

jednu kap krvi kapnuti na rub čistog predmetnog stakalca (veličina 26x76 mm) a drugim stakalcem položenim pod kutem od 45º razvući kap krvi u jednom potezu. Osušiti na zraku i poslati u laboratorij. 

  • za izradu preparata guste kapi:

na sredinu  predmetnog stakalca kapnuti 2-3 kapi krvi i vrhom drugog stakalca spojiti kapi u krug promjera 1,0 cm. Osušiti na zraku i poslati u laboratorij. 

  • za dokaz filarioze treba uzeti uzorke krvi za izradu preparata krvnog razmaza i guste kapi uzimajući u obzir periodično pojavljivanje mikrofilarija u krvnoj cirkulaciji (dnevno-noćni ritam).

      Nalaz se izdaje unutar 24 sata.

Uzorak likvora za bakteriološku i mikološku pretragu

  • uzorak likvora treba uzeti u bolničkoj ustanovi.
  • za bakteriološku pretragu uzorka likvora potrebna je količina od najmanje 1 ml likvora.
  • za mikološku pretagu uzorka likvora potrebna su 2 ml likvora.                                                                                                                                                          Molekularni nalaz se izdaje isti dan. Pozitivni rezultati se javljuju odmah  telefonski na odjel (preliminarni i definitivni) Negativan nalaz se izdaje za 5 dana. Vrijeme izdavanja pozitivnog nalaza ovisi o brzini rasta izoliranog patogena.

 Uzorak mokraće za bakteriološku, virološku i mikološku pretragu

  • treba uzeti srednji mlaz prve jutarnje mokraće.
  • prije uzimanja uzorka mokraće potrebno je oprati vanjsko spolovilo toplom vodom i  sapunom, te osušiti papirnatom maramicom.
  • uzorak mokraće treba dostaviti u laboratorij u roku od dva sata.
  • ukoliko to nije moguće uzorak treba pohraniti na  +4°C i dostaviti u laboratorij  najkasnije unutar 24 sata od uzimanja uzorka.
  • postupak uzimanja uzorka mokraće za dokaz infekcije Chlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae, Mycoplasma genitalium, Ureaplasma urealyticum, Mycoplasma hominis, Trihomonas vaginalis, Herpes simplex 1, Herpes simplex 2 isti je kao i za standardnu bakteriološku i mikološku pretragu mokraće, osim što je potrebno uzeti prvi mlaz prve jutarnje mokraće
  • postupak uzimanja uzorka mokraće za dokaz tuberkuloze isti je kao i za standardnu bakteriološku i mikološku pretragu mokraće osim što je potrebno uzeti više uzoraka tijekom 3 do 5 dana

Kod djece do 2-3 godine uzima se urin pomoću vrećice, koja se lijepi na opranu i posušenu kožu.  Sterilna vrećica se drži 1 sat, a dobiveni urin se prelije u sterilnu posudu. Ako se ne dobije urin u vremenu od 1 sata, vrećicu treba zamijeniti novom.

Negativan nalaz se izdaje za 1 dana. Pozitivan nalaz se izdaje za 2- 4 dana.

Molekularni nalaz Chlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae, Mycoplasma genitalium, Ureaplasma urealyticum, Mycoplasma hominis, Trihomonas vaginalis, Herpes simplex 1, Herpes simplex 2 se izdaje untar 5 dana.

 Uzorak mokraće za parasitološku pretragu (obrisak uretre ili vagine, ejakulat)

  • za dokaz trihomonijaze treba uzeti prvi mlaz prve jutarnje mokraće i dostaviti u laboratorij u roku od 2 sata na temperaturi od 30-37ºC (u džepu uz tijelo u dobro zatvorenoj sterilnoj posudici); ako se radi o brisevima također treba uzorke dostaviti što prije u laboratorij
  • Nalaz se izdaje unutar 24 sata.

Obrisak uretre za bakteriološku i mikološku pretragu

  • potrebno je uzeti uzorak prije prvog jutarnjeg mokrenja, ili barem 4 sata od posljednjeg mokrenja
  • tanki štapić sa pamučnim brisom uvede se 2-4 cm u uretru i lagano zarotira, te ostavi nekoliko sekundi da upije sekret
  • za izradu preparata za mikroskopiju treba uzeti zaseban ( prvi) bris
  • kod zahtjeva za dg. Neisseria gonorrhoeae treba na uputnici naglasiti traženu pretragu
  • kod pretrage na mikoplazme koristi se priloženi transportni medij, te se obrisak nakon uzimanja uroni u medij, istisne namočeni bris, te odbaci kao infektivan materijal
  • za pretragu na klamidiju kod muškaraca se uzima prvi mlaz prvog jutarnjeg urina.
  • obriske treba što hitnije dostaviti na obradu u laboratorij, osobito kod pretrage na gonoreju;

Ukoliko nije moguće dostaviti materijal u roku 2 sata, preporuča se koristiti transportni medij

Nalaz je gotov za 2-3 dana. 

Obrisak (endo)cerviksa, rodnice za bakteriološku, virološku i mikološku pretragu

  • uzorak uzima ginekolog pri pregledu, pa je važno naglasiti da treba sa jednim brisom odstraniti endocervikalnu sluz, a drugi bris namijeniti za uzimanje materijala za mikrobiološku pretragu
  • za mikoplazme se koristi priloženi transportni medij, u koji se unese i istisne sadržaj sa brisa
  • za pretragu na HPV veliki bris (više omotane vate) služi za ostranjenje viška sluzi s endocerviksa, a potom se baci kao infektivni materijal. Drugi bris (s manje vate) uvesti u endocervikalni kanal, snažno rotira (15-30sekundi), pažljivo izvadi uz izbjegavanje dodira stijenke vagine.
  • tako uzeti bris odložiti u transportnu epruvetu (koja je u setu),te ga prelomiti na zarezanoj crti kako bi ostao u epruveti.
  • uzorci se dostave u roku 2 h u laboratorij, ili se pohrane u transportni medij do 24 h ( 4°C)
  • Klasični bakteriološki nalaz (kultivacija, mikroskopiranje i antibiogram u slučaju pozitivnog nalaza) je gotov za 2-3 dana.
  • Molekularni nalaz HPV- rezultati unutar 2-3 tjedna.
  • Molekularni nalaz Chlamydia trachomatisNeisseria gonorrhoeae, Mycoplasma genitalium, Ureaplasma urealyticum, Mycoplasma hominis, Trihomonas vaginalis, Herpes simplex 1, Herpes simplex 2 untar 5 dana. 

Obrisak vagine / rektuma za screening na BHS-B

  • u slučaju obilne sekrecije, ona se posebnim brisom odstrani
  • zbrisak se dostavi u roku 2 h u laboratorij ili se pohrani do 24 h u transportni medij i čuva na sobnoj temperaturi
  • Nalaz je gotov za 3-4 dana.